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课题整体外包(western blot、免疫共沉淀、免疫组化、免疫荧光、动物实验、细胞实验、ChIP实验等)

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2021-06-10 10:31

南京博恩生物技术有限公司

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南京博恩生物技术有限公司
刘经理
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提供商 南京博恩生物技术有限公司
服务名称 基金课题整体实验外包服务
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1、博恩生物技术服务优势(western blot篇)

近年来越来越多的文章科研造假被挖出,甚至涉及到NATURE等期刊,这其中最被诟病的就是western blot实验的造假,大多文章撤稿都和western blot条带造假被发现有关。

因此越来越多的期刊要求作者在投稿时必须上传western blot条带结果未经剪裁的原图,甚至要求这些图片必须要有全长marker标识相应蛋白的分子量。这个是不可逆转的大趋势,逐渐越来越多的期刊会加入到这一标准中来。现在做实验,如果还不用这套标准,未来投稿将寸步难行。

如果您担心自己的科研前途毁于western blot的被造假,那选择博恩生物是最佳选择。博恩生物除了为您提供拟合好的高颜值大图外,还为您献上带有marker分子量的史上最严格的western blot原始图片,就算投nature也会再担心条带造假的问题。全网您只能在博恩生物得到这样的支持。

 

那究竟什么叫做原图呢?期刊对于原图又有什么要求呢?

我们可以对比一下下图中1、2、3。图一是最普通的条带图,图2虽然是未裁剪的,但是并没有全长的marker标识分子量。而博恩生物提供给客户的结果都是图3这种最高的标准结果图。目前大部分期刊也都是要求的图3这种图。但是这种做法的缺点就是成本高,实验难度大。因此大部分实验室和公司都不会采用这样的方式。

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2、博恩生物技术服务优势(示意图篇)

针对整体研究项目,博恩可为客户提供分子机制示意图制作服务。

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3、博恩生物技术服务优势(方案审核篇)

博恩生物会对客户的方案进行合理性、可行性审核,避免实验设计环节出现严重问题。

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4、博恩生物技术服务优势(完善的实验技术篇)

博恩生物可为客户提供包含动物实验、细胞实验、western blot、PCR、co-IP、ELISA、RIA、免疫组化、免疫荧光、病理染色、ChIP、RNA pulldown、GST pulldown、EMSA、荧光素酶报告基因、siRNA/shRNA/慢病毒/腺病毒/腺相关病毒转染、RIP、流式细胞术、激光共聚焦等多项实验技术服务。

Western blot、ELISA、免疫荧光、免疫组化的区别:

免疫组化或免疫荧光:检测蛋白表达,为定性实验为主,一般应用于组织居多,细胞应用较少,细胞可以使用免疫荧光实验。主要用于考察蛋白的定位、共定位等情况。

推荐应用:临床组织、动物组织标本的关键性蛋白检测。

western blot:检测蛋白表达或转录后修饰(磷酸化、剪切体、甲基化、苏素化、泛素化、乙酰化、多聚体、降解等),与其他实验技术结合可以达到多种目的。应用最为广泛。细胞和组织都可以应用,也可以通过提取不同亚细胞组成用于检测蛋白的定位情况。为半定量实验。

推荐应用:细胞或组织中通路蛋白、一般蛋白的表达或转录后修饰。

ELISA:为定量实验,主要用于分泌型蛋白的检测居多。也可以用于动物血清、组织、细胞上清的蛋白检测。但是不适用于蛋白转录后修饰的检测,不推荐通路相关蛋白的检测。

推荐应用:细胞上清、组织、动物血清中分泌型蛋白,如细胞因子的检测。

 

PCR、western blot、ELISA的取舍?

PCR:检测的是mRNA,在一些特定情况下mRNA变化不等同于蛋白变化,如蛋白降解等。此外,某些mRNA是一定可以翻译成蛋白的,如miRNA、lncRNA、circRNA等,这种情况只能选择PCR检测RNA。此外,一些通路蛋白,如p65、β-catenin等,有较多转录后修饰方式,如磷酸化,这种发生于蛋白层面的变化PCR也是无能为力的。

推荐应用:临床组织、动物组织标本的mRNA、lncRNA、circRNA、miRNA检测。

western blot:检测蛋白表达或转录后修饰(磷酸化、剪切体、甲基化、苏素化、泛素化、乙酰化、多聚体、降解等),与其他实验技术结合可以达到多种目的。应用最为广泛。细胞和组织都可以应用,也可以通过提取不同亚细胞组成用于检测蛋白的定位情况。为半定量实验。

推荐应用:细胞或组织中通路蛋白、一般蛋白的表达或转录后修饰。

ELISA:为定量实验,主要用于分泌型蛋白的检测居多。也可以用于动物血清、组织、细胞上清的蛋白检测。但是不适用于蛋白转录后修饰的检测,不推荐通路相关蛋白的检测。

推荐应用:细胞上清、组织、动物血清中分泌型蛋白,如细胞因子的检测。

 

co-IP、GST pulldown、ChIP、RIP、RNA pull-down、EMSA、荧光素酶报告基因的逻辑关系比较

ChIP、EMSA:蛋白与DNA结合情况。

RIP、RNA pull-down:蛋白与RNA结合情况。

荧光素酶报告基因:启动子激活情况。

co-IP、GST pulldown:蛋白之间结合情况、蛋白特殊转录后修饰研究,如泛素化、苏素化等。

 

ChIP、RIP、RNA pull-down、EMSA、荧光素酶报告基因的比较

ChIP:通过与染色质片段共沉淀和PCR技术,在体内检测与特异蛋白质结合的DNA。将处于适当生长时期的活细胞用甲醛交联后将细胞裂解, 染色体分离并打碎为一定大小的片段200bp-1000bp;然后用特异性抗体免疫沉淀目标蛋白与 DNA交联的复合物, 对特定靶蛋白与DNA进行富集。采用低pH值条件反交联, DNA与蛋白质之间的 Schiff键水解, 释放DNA。通过对目标片段的纯化与检测,获得DNA与蛋白质相互作用的序列信息。 

研究目的:蛋白与DNA结合情况。

RIP:RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术。运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分析;即用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白,防止非特异性的RNA的结合,免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来,结合的RNA序列通过microarray (RIP-Chip),定量RT-PCR或高通量测序(RIP-Seq)方法来鉴定。是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,能帮助我们发现miRNA的调节靶点。 

研究目的:蛋白与RNA结合情况。

RNA pull-down:使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。

研究目的:蛋白与RNA结合情况。

EMSA:凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用、DNA定性和定量分析。生物素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。

研究目的:蛋白与DNA结合情况。

荧光素酶报告基因:荧光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中,将不同类型的细胞(干细胞、T细胞等)标记上(即表达)荧光素酶,就可以用高敏感度的CCD相机进行对动物体内进行活体观察而不会伤害到动物本身。在荧光素酶中加入正确的萤光素底物就可以放出荧光,而发出的光子可以被光敏感元件,如萤光探测器或改进后的光学显微镜探测到。这就使得对包括感染在内的多种生命活动进程进行观察成为可能。

研究目的:启动子激活情况。


 

5、博恩生物技术服务优势(精美报告结果图篇)

博恩生物为客户提供拟合好的精美实验结果图,可以直接用于文章发表。


6、博恩生物技术服务优势(完善的动物模型篇)

博恩生物可为客户提供种类繁多的动物模型制备服务。

 


与我们联系:
1、如您对我们的服务感兴趣,可以下载产品资料中的研究方案模板(
http://www.biornscience.com/News_lists_sort_3.shtml)进行填写,并发送至我们的官方邮箱:biornservice@163.com,我们将据此为您快捷报价。
2、客服QQ:3153667915
3、客服微信:17714345757
4、欢迎您访问我们的官网:
www.biornscience.com

我们可以为您提供的实验服务有(包含但不限于,点击网址可直接访问查看详情):

     1、动物疾病模型制备:http://www.biornscience.com/News_read_id_128.shtml

     2、整体课题实验外包:http://www.biornscience.com/News_read_id_130.shtml

     3、动物行为学实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_149.shtml

     4、western blot实验(全长marker整膜抗体孵育):http://www.biornscience.com/News_read_id_129.shtml

     5、ceRNA网络/lncRNA/circRNA/miRNA相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_138.shtml

     6、腺病毒、慢病毒、腺相关病毒转染:http://www.biornscience.com/News_read_id_137.shtml

     7、荧光素酶报告基因实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_189.shtml

     8、MTT、CCK8、SRB、克隆形成、EdU等细胞增殖检测实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_176.shtml

     9、裸小鼠移植瘤、普通小鼠荷瘤、癌转移动物模型:http://www.biornscience.com/News_read_id_203.shtml

    10、原代细胞提取、培养基相关实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_151.shtml

    11、免疫荧光实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_139.shtml

    12、划痕实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_133.shtml

    13、ELISA实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_152.shtml

    14、PCR实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_142.shtml

    15、细胞铁死亡相关研究实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_204.shtml

    16、各类细胞实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_193.shtml

    17、原位杂交(FISH):http://www.biornscience.com/News_read_id_192.shtml

    18、免疫组化实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_190.shtml

    19、流式细胞术检测细胞亚型:http://www.biornscience.com/News_read_id_184.shtml

    20、流式细胞术检测巨噬细胞极化:http://www.biornscience.com/News_read_id_183.shtml

    21、活性氧ROS检测:http://www.biornscience.com/News_read_id_182.shtml

    22、自噬相关实验及自噬流检测:http://www.biornscience.com/News_read_id_179.shtml

    23、小管形成实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_178.shtml

    24、EdU细胞增殖实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_177.shtml

    25、TUNEL凋亡染色:http://www.biornscience.com/News_read_id_175.shtml

    26、免疫共沉淀实验(coip):http://www.biornscience.com/News_read_id_154.shtml

    27、流式细胞术检测细胞周期:http://www.biornscience.com/News_read_id_146.shtml

    28、流式细胞术检测细胞凋亡:http://www.biornscience.com/News_read_id_145.shtml

    29、各类病理切片染色:http://www.biornscience.com/News_read_id_143.shtml

    30、克隆形成实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_134.shtml

    31、蛋白泛素化检测:http://www.biornscience.com/News_read_id_141.shtml

    32、蛋白乙酰化检测:http://www.biornscience.com/News_read_id_180.shtml

    33、流式细胞术检测小胶质细胞极化:http://www.biornscience.com/News_read_id_148.shtml

    34、流式细胞术检测T细胞极化:http://www.biornscience.com/News_read_id_147.shtml

    35、transwell实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_144.shtml

    36、细胞焦亡相关实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_140.shtml

    37、ChIP实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_187.shtml

    38、EMSA实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_188.shtml

    39、RNA pulldown实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_181.shtml

    40、GST pulldown实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_191.shtml

    41、扫描电镜、透射电镜实验:http://www.biornscience.com/News_read_id_196.shtml

    42、mTOR通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_162.shtml

    43、JAK-STAT通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_161.shtml

    44、HIF-1通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_159.shtml

    45、Hedgehog通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_157.shtml

    46、炎症小体相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_160.shtml

    47、凋亡通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_156.shtml

    48、Hippo通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_158.shtml

    49、EGFR通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_155.shtml

    50、NF-κB通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_163.shtml

    51、wnt/β-catenin通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_168.shtml

    52、PI3K-AKT通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_169.shtml

    53、JNK通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_171.shtml

    54、TGFβ-SMAD通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_172.shtml

    55、自噬通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_173.shtml

    56、ERK通路相关研究:http://www.biornscience.com/News_read_id_205.shtml

 

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