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E2F-GFP报告基因质粒 报告基因检测

¥110-1990
百奥莱博
北京
2022-09-01 09:52

北京百奥莱博科技有限公司

我要认领
北京百奥莱博科技有限公司
王欣
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产品属性
产品说明

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应E2F-GFP报告基因质粒 报告基因检测,我公司销售全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


名称:E2F-GFP报告基因质粒 报告基因检测
规格:1μg
品牌:百奥莱博
编号:SY0198
产地:国产|进口
E2F-GFP报告基因是用于检测E2F转录活性水平为目的的报告基因。E2F转录因子在细胞周期调控中起重要的作用。研究证明,E2F-1对细胞的生长具有双向调节作用,可以调节细胞的增殖和凋亡。因此,E2F与肿瘤发生、细胞凋亡、肿瘤抑制等均有密切关系。

E2F-GFP报告基因主要用于检测细胞中Cell Cycle信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGME2F-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个E2F结合位点,可以高效地检测E2F的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得E2F-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM E2F -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGME2F-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件:-20℃。

更多有关E2F-GFP报告基因质粒 报告基因检测的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
ARB11188 人降钙素(CT)ELISA代测服务 Human calcitonin,ct ELISA KIT
BTN120419 大肠杆菌DNA连接酶 E.coli DNA Ligase
N-羟基琥珀酰亚胺 Lithium acetate dihydrate 6066-82-6
吡硫鎓钠 Elastase 3811-73-2
ARB13681 兔血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)血清中含量检测 Rabbit vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
BL1227 D-Hanks,不含钙镁,含酚红(HBSS)
73049-73-7 胰蛋白胨
ARB11557 人流行性出血热IgG抗体(EHF IgG)定量分析 Human anti-epidemic hemorrhagic fever igG antibody,ehf igG ELISA KIT
ARB12792 小鼠β内啡肽(β-EP)Elisa方法检测 Mouse beta-*********,β-ep ELISA KIT
ARB13518 鱼类促性腺激素释放激素(GnRH)含量检测 Fish gnrh ELISA KIT
BL0953 胶体金标记羊抗小鼠IgG抗体
548-62-9 Crystal violet 结晶紫
ARB11066 人转录因子抗体-1(ATF-1)Elisa定量检测 Human activating transcription factor-1,atf-1 ELISA KIT
ARB12624 大鼠维生素D(VD)血清中含量检测 Rat vitamin d,vd ELISA KIT
CYB165001 HRP标记亲合素
PY01-118  多价蛋白胨  250克  
ARB11170 人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)定量分析 Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,mcp-1/mcaf ELISA KIT
ARB13264 小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)检测服务 Mouse a disintegrin and metalloprotease 8,adam8 ELISA KIT
F010205 小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG
003003 猪血浆
E2F-GFP报告基因质粒 报告基因检测关键词:SY0198,E2F-GFP报告基因质粒,E2F GFP Reporter Plasmid


·脂质体核酸转染试剂
编号:SY0603
英文名称:Liposome nucleic acid transfection reagent
规格:0.5ml
脂质体核酸转染试剂是一种多用途的脂质体转染试剂,适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染,对大多数真核细胞具有很高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸-复合物或更换新鲜培养基,也可在4~6小时后除去。

以无菌的液体形式提供。通常情况下对于 24 孔板转染,每次用1.5μl左右,则1ml 约可做660 次转染;对于6孔板,每次用6μl左右,则1ml 约可做160 次转染;

储存条件:4℃,有效期一年。

注意事项

1)脂质体核酸转染试剂要求细胞铺板密度较高,以90%-95%为佳,这有助于减少阳离子脂质体细胞毒性造成的影响;如果你研究的基因要求比较长的表达时间,比如细胞周期相关基因,或者细胞表面蛋白,最好选择细胞铺板密度要求较低的转染试剂,不适合用脂质体核酸转染试剂。
2)脂质体核酸转染试剂可用于有血清培养基的转染,并且转染前后不需要换培养基。但是,制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂,因为血清会影响复合物的形成。另外,要检测所用的无血清培养基与脂质体核酸转染试剂的相容性,已知CD293, SFMII, VP-SFM 就不相容。
3)转染的时候培养基中不能添加抗生素。
4)使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率,质粒中的内毒素是转染的大敌。
5)阳离子脂质体应该在4度保存,要注意避免多次反复长时间开盖,因为可能会导致脂质体氧化而影响转染效率。
6)初次使用应优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到最大的转染效率。DNA 和转染试剂的比例,通常推荐是1:2-1:3,比如24孔板内接种0.5-2×105个细胞,使用0.5 µg DNA和1-1.5 µl 转染试剂。通过调整DNA/脂质体核酸转染试剂比例优化转染效率,保证细胞密度大于90%,DNA(μg): (μl)比值在1:0.5-1:5。


E2F-GFP报告基因质粒 报告基因检测关键词:SY0198,E2F-GFP报告基因质粒,E2F GFP Reporter Plasmid


·溴化乙锭
编号:SY0249
英文名称:Ethidium Bromide (EB)
规格:1g
本品为粉末状EB,可配制成10mg/ml的储存液。用于电泳检测时,工作浓度为 0.5μg/ml。溴化乙锭,英文名Ethidium bromide,缩写EB,一种DNA嵌入剂,可插入DNA/RNA中,其插入双链RNA、双链DNA后荧光强度分别增强21倍、25倍,因此在低浓度(10μg/ml)染色后无需脱色,是分子生物学常用的一种核酸染料、移码诱变剂、DNA/RNA酶抑制剂。溴化乙锭已用于核酸的许多荧光分析,还可结合到单链 DNA(虽然强度不高)和三链 DNA 上。另外,EB可与吖啶橙结合用于区分存活的、凋亡和坏死的细胞。

使用方法

一、胶染法(电泳前染色)

1. 制胶时加入EB 核酸染料使其工作浓度0.5μg/ml(每50mL 琼脂糖溶液中加入2.5μL 10mg/ml EB水溶液)。
2. 按照常规方法进行电泳。

注意事项

1) 此方法比较节省染料,250 μL(10mg/ml)染料大约可以做100块 50mL的胶。
2) EB兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
3) 胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
4) 在染料的存在下,线状双链DNA的迁移率减小了15%。

二、泡染法(电泳后染色)

1. 按照常规方法进行电泳。
2. 室温下将电泳后的凝胶在含有EtBr (0.5ug/ml)的电泳缓冲液或水中浸泡30-45min。
3. (可选)对于检测较小量DNA(<10ng),可将EB染色后的凝胶于水或1mM MgSO4 中室温脱色20min,从而降低因未结合EB引起的背景荧光信号。

储存条件:室温,避光,有效期4年。



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