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小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/角化细胞内分泌因子(KAF)ELISA试剂盒

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名劲生物
国产
2022-08-29 20:21

上海名劲生物科技有限公司

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上海名劲生物科技有限公司
张丽
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sh@mjswkj.cn
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产品属性
产品说明

小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/角化细胞内分泌因子(KAF)ELISA试剂盒

 



样品收集、处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
  1. 酶标仪(450nm)
  2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  3. 37℃恒温箱

操作注意事项
  1.   试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
  2.   实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
  3.   浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
  4.   严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
  5.   所有液体组分使用前充分摇匀。

小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/角化细胞内分泌因子(KAF)ELISA试剂盒

 

试剂盒组成
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条
标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管
样本稀释液 6mL 3mL
检测抗原-HRP 10mL 5mL
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL
底物B 6mL 3mL
终止液 6mL 3mL
封板膜 2张 2张
说明书 1份 1份
自封袋 1个 1个

操作步骤
  1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  3.   样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

 

小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/角化细胞内分泌因子(KAF)ELISA试剂盒

 

试剂盒性能
  1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
  2.  灵敏度:最低检测浓度小于0.1 U/mL。
  3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
  4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
  5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
  6.  有效期:6个月
免责声明
  1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
  2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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