艾博因I-bio艾博因I-bio艾博因I-bio拥有生物领域经验丰富的研发团队,一直致力于研发生产高质量的科研试剂,专业的技术力量使我们能够为广大用户提供强大的技术支持,主要产品为抗体、流式抗体、ELISA试剂盒、生化试剂盒、标记试剂盒和其它相关试剂。
第一抗体就是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
根据检测的种属和实验方法寻找相关一抗产品,样品的性质决定哪个抗体最合适。需考虑以下方面:
根据检测的种属和实验方法寻找相关一抗产品,样品的性质决定哪个抗体最合适。需考虑以下方面:
(1) 检测的蛋白质区域。有些抗体仅能识别已还原和变性的蛋白质,因为这样露出了蛋白质折叠形成的二级和三级结构中隐藏起来的表位。而有些抗体
仅能识别天然、折叠状态的蛋白质上的表位。免疫组化中,有些抗体仅适用于未固定的冷冻组织,如果没有抗原修复步骤逆转福尔马林固定所引起的交联,那么其它抗体不能与福尔马林固定、石蜡包埋的组织中的靶标结合。
(1) 检测的蛋白质区域。有些抗体仅能识别已还原和变性的蛋白质,因为这样露出了蛋白质折叠形成的二级和三级结构中隐藏起来的表位。而有些抗体
仅能识别天然、折叠状态的蛋白质上的表位。免疫组化中,有些抗体仅适用于未固定的冷冻组织,如果没有抗原修复步骤逆转福尔马林固定所引起的交联,那么其它抗体不能与福尔马林固定、石蜡包埋的组织中的靶标结合。
(2) 样品处理方式;有些抗体要求样品用特定方式处理。
(2) 样品处理方式;有些抗体要求样品用特定方式处理。
(3) 产生一抗的生物体应与样品生物体不同;这是为了避免抗免疫球蛋白的二抗与样品中的内源性免疫球蛋白间发生交叉反应。
(3) 产生一抗的生物体应与样品生物体不同;这是为了避免抗免疫球蛋白的二抗与样品中的内源性免疫球蛋白间发生交叉反应。
如何保存和分装抗体?
如何保存和分装抗体?如何保存和分装抗体?
对于许多抗体而言,分装为小等份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下冻存是最佳的保存条件。抗体保存应避免反复冻融,分装可以最大限度减少冻融对抗体造成的损坏,还可避免多次从同一管中移取抗体而引入污染。但是每份不应该少于10 uL。分装的体积越小,抗体的浓度受蒸发和管壁吸附的影响就会越大。大部分情况下,抗体在 4 ℃条件下能够保存1-2周。但有部分特例。为了防止微生物污染,可在抗体中加入适当浓度的NaN3。如果要用抗体对活细胞进行染色或处理,或者要用抗体进行体内研究,则不能使用含NaN3的抗体制备物;这种抗菌剂对大部分生物体都有毒害作用。
对于许多抗体而言,分装为小等份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下冻存是最佳的保存条件。抗体保存应避免反复冻融,分装可以最大限度减少冻融对抗体造成的损坏,还可避免多次从同一管中移取抗体而引入污染。但是每份不应该少于10 uL。分装的体积越小,抗体的浓度受蒸发和管壁吸附的影响就会越大。大部分情况下,抗体在 4 ℃条件下能够保存1-2周。但有部分特例。为了防止微生物污染,可在抗体中加入适当浓度的NaN3。如果要用抗体对活细胞进行染色或处理,或者要用抗体进行体内研究,则不能使用含NaN3的抗体制备物;这种抗菌剂对大部分生物体都有毒害作用。
部分加甘油的抗体,直接储存在-20℃即可。
部分加甘油的抗体,直接储存在-20℃即可。
IHC常见的问题:
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