基本信息基本信息基本信息基本信息基本信息
名称:名称:名称:名称:pComb3XSS噬菌体展示质粒
别称: 别称: 别称别称
: : : Plasmid#63890
启动子: | Lac/lac promoter |
复制子: | pUC |
质粒大小: | 4991bp |
质粒标签: | C-6×HIS,C-HA |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | TG1 |
培养条件: | 37度 |
启动子: | Lac/lac promoter |
复制子: | pUC |
质粒大小: | 4991bp |
质粒标签: | C-6×HIS,C-HA |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | TG1 |
培养条件: | 37度 |
启动子: | Lac/lac promoter |
启动子: | 启动子:
Lac/lac promoter | Lac/lac promoter
复制子: | pUC |
复制子: | 复制子:
pUC | pUC
质粒大小: | 4991bp |
质粒大小: | 质粒大小:
4991bp | 4991bp
质粒标签: | C-6×HIS,C-HA |
质粒标签: | 质粒标签:
C-6×HIS,C-HA | C-6×HIS,C-HA
原核抗性: | Amp |
原核抗性: | 原核抗性:
Amp | Amp
克隆菌株: | TG1 |
克隆菌株: | 克隆菌株:
TG1 | TG1
培养条件: | 37度 |
培养条件: | 培养条件:
37度 | 37度
质粒属性质粒属性质粒属性质粒属性质粒属性
载体宿主: | 大肠杆菌,噬菌体 |
载体用途: | 蛋白表达,抗体表达 |
基因种属: | 空载体 |
基因类型: | ORF |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: | |
荧光蛋白: |
载体宿主: | 大肠杆菌,噬菌体 |
载体用途: | 蛋白表达,抗体表达 |
基因种属: | 空载体 |
基因类型: | ORF |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: | |
荧光蛋白: |
载体宿主: | 大肠杆菌,噬菌体 |
载体宿主: | 载体宿主:
大肠杆菌,噬菌体 | 大肠杆菌,噬菌体
载体用途: | 蛋白表达,抗体表达 |
载体用途: | 载体用途:
蛋白表达,抗体表达 | 蛋白表达,抗体表达
基因种属: | 空载体 |
基因种属: | 基因种属:
空载体 | 空载体
基因类型: | ORF |
基因类型: | 基因类型:
ORF | ORF
原核抗性: | Amp |
原核抗性: | 原核抗性:
Amp | Amp
真核抗性: | |
真核抗性: | 真核抗性:
| 荧光蛋白: |
荧光蛋白: | 荧光蛋白:
质粒简介质粒简介质粒简介质粒简介质粒简介
pComb3XSS是一个噬菌体展示质粒。pComb3X is the newest of the pComb vectors. Improvements over pComb3 include increased stability and introduction of an asymmetric SfiI cassette for directional cloning of full Fab, scFv, peptide and other protein for phage display. 6xHis and HA tags allow for purification and detection. An amber stop codon was introduced to turn-off expression of the pIII fusion protein by switching to a non-supressor strain of E. coli allowing production of soluble protein without subcloning. Alternatively, the gene for phage protein pIII can be removed by SpeI/NheI digest. pComb3XSS is recommended for preparation of vector for library cloning. The “SS” refers to the double stuffer, a 1200bp stuffer in the Fab light chain cloning region bounded by SacI and XbaI restriction sites and a 300bp stuffer in Fab heavy chain cloning region bound by XhoI and SpeI restriction sites. Also, the 1600bp double stuffer (both stuffers plus the leader sequence between the Fab light chain and heavy chain cloning regions) can be removed by SfiI digest so that non-Fab genes of interest can be cloned. Also available on Addgene: pComb3XTT and pComb3XLambda are only needed at templates for the construction of chimeric Fab libraries as described in Phage Display: A Laboratory Manual. pComb3XTT can also be used as an Fab expression control. 3rd generation plasmid for phage display on modified geneIII, contains stuffer fragment.
质粒图谱质粒图谱质粒图谱质粒图谱质粒图谱
质粒序列质粒序列质粒序列质粒序列质粒序列
LOCUS Exported 4991 bp ds-DNA circular SYN 27-OCT-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4991)
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4991
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
protein_bind 109..130
/label=CAP binding site
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
promoter 145..175
/label=lac promoter
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 183..199
/label=lac operator
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
misc_feature 294..1470
/label=Light Chain
CDS complement(574..591)
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/label=6xHis
/translation="HHHHHH"
misc_feature 1500..1577
/label=PelB Leader
CDS 1584..1907
/codon_start=1
/gene="trxA"
/product="E. coli thioredoxin"
/label=Heavy Chain
/translation="MSDKIIHLTDDSFDTDVLKADGAILVDFWAEWCGPCKMIAPILDE
IADEYQGKLTVAKLNIDQNPGTAPKYGIRGIPTLLLFKNGEVAATKVGALSKGQLKEFL
DANL"
CDS 1962..1979
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/label=6xHis
/translation="HHHHHH"
CDS 1986..2012
/codon_start=1
/product="HA (human influenza hemagglutinin) epitope tag"
/label=HA
/translation="YPYDVPDYA"
CDS 2118..2552
/codon_start=1
/label=geneIII
/translation="MANANKGAMTENADENVLQSDAKGKLDSVATDYGAAIDGFIGDVS
GLANGNGATGDFAGSNSQMAQVGDGDNSPLMNNFRQYLPSLPQSVECRPFVFGAGKPYE
FSIDCDKINLFRGVFAFLLYVATFMYVFSTFANILRNKES"
rep_origin complement(2606..3061)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 3088..3192
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 3193..4053
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 4224..4812
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 agagcgccca atacgcaaac cgcctctccc cgcgcgttgg ccgattcatt aatgcagctg
61 gcacgacagg tttcccgact ggaaagcggg cagtgagcgc aacgcaatta atgtgagtta
121 gctcactcat taggcacccc aggctttaca ctttatgctt ccggctcgta tgttgtgtgg
181 aattgtgagc ggataacaat tgaattcagg aggaatttaa aatgaaaaag acagctatcg
241 cgattgcagt ggcactggct ggtttcgcta ccgtggccca ggcggccgag ctcgccatgg
301 ctggttgggc agcgagtaat aacaatccag cggctgccgt aggcaatagg tatttcatta
361 tgactgtctc cttggcgact agctagttta gaattcgtaa tcatggtcat agctgtttcc
421 tgtgtgaaat tgttatccgc tcacaattcc acacaacata cgagccggaa gcataaagtg
481 taaagcctgg ggtgcctaat gagtgagcta actcacatta attgcgttgc gctcactgcc
541 cgctttccag tcgggaaacc tgtcgtgtta ctaatgatgg tgatggtgat ggctagtttt
601 gtcacaagat ttgggctcaa ctttcttgtc caccttggtg ttgctgggct tgtgattcac
661 gttgcagatg taggtctggg tgcccaagct gctggagggc acggtcacca cgctgctgag
721 ggagtagagt cctgaggact gtaggacagc cgggaaggtg tgcacgccgc tggtcagggc
781 gcctgagttc cacgacaccg tcgccggttc ggggaagtag tccttgacca ggcagcccag
841 ggccgctgtg cccccagagg tgctcttgga ggagggtgcc agggggaaga ccgatgggcc
901 cttggtggag gctgcggaga cggtgaccgt ggtaccagca gaaacctggc caggctccca
961 ggctcctcat ctatggtaca tccagcaggg ccactggcat cccagacagg ttcagtggca
1021 gtgggtctgg gacagacttc actctcacca tcagcagact ggagcctgaa gattttgcag
1081 tgtactactg tcagcagtat ggtggctcac cgtggttcgg ccaagggacc aaggtggaac
1141 tcaaacgaac tgtggctgca ccatctgtct tcatcttccc gccatctgat gagcagttga
1201 aatctggaac tgcctctgtt gtgtgcctgc tgaataactt ctatcccaga gaggccaaag
1261 tacagtggaa ggtggataac gccctccaat cgggtaactc ccaggagagt gtcacagagc
1321 aggacagcaa ggacagcacc tacagcctca gcagcaccct gacgctgagc aaagcagact
1381 acgagaaaca caaagtctac gcctgcgaag tcacccatca gggcctgagc ttgcccgtca
1441 caaagagctt caacagggga gagtgttagt tctagataat taattaggag gaatttaaaa
1501 tgaaatacct attgcctacg gcagccgctg gattgttatt actcgctgcc caaccagcca
1561 tggccgaggt gcagctgctc gagatgagcg ataaaattat tcacctgact gacgacagtt
1621 ttgacacgga tgtactcaaa gcggacgggg cgatcctcgt cgatttctgg gcagagtggt
1681 gcggtccgtg caaaatgatc gccccgattc tggatgaaat cgctgacgaa tatcagggca
1741 aactgaccgt tgcaaaactg aacatcgatc aaaaccctgg cactgcgccg aaatatggca
1801 tccgtggtat cccgactctg ctgctgttca aaaacggtga agtggcggca accaaagtgg
1861 gtgcactgtc taaaggtcag ttgaaagagt tcctcgacgc taacctggcg tacccgtacg
1921 acgttccgga ctacggttct actagtggcc aggccggcca gcaccatcac catcaccatg
1981 gcgcataccc gtacgacgtt ccggactacg cttcttagga gggtggtggc tctgagggtg
2041 gcggttctga gggtggcggc tctgagggag gcggttccgg tggtggctct ggttccggtg
2101 attttgatta tgaaaagatg gcaaacgcta ataagggggc tatgaccgaa aatgccgatg
2161 aaaacgtgct acagtctgac gctaaaggca aacttgattc tgtcgctact gattacggtg
2221 ctgctatcga tggtttcatt ggtgacgttt ccggccttgc taatggtaat ggtgctactg
2281 gtgattttgc tggctctaat tcccaaatgg ctcaagtcgg tgacggtgat aattcacctt
2341 taatgaataa tttccgtcaa tatttacctt ccctccctca atcggttgaa tgtcgccctt
2401 ttgtctttgg cgctggtaaa ccatatgaat tttctattga ttgtgacaaa ataaacttat
2461 tccgtggtgt ctttgcgttt cttttatatg ttgccacctt tatgtatgta ttttctacgt
2521 ttgctaacat actgcgtaat aaggagtctt aagctagcta attaatttaa gcggccgcag
2581 atctgctctc tgaggaggat ctgggaaatt gtaagcgtta atattttgtt aaaattcgcg
2641 ttaaattttt gttaaatcag ctcatttttt aaccaatagg ccgaaatcgg caaaatccct
2701 tataaatcaa aagaatagac cgagataggg ttgagtgttg ttccagtttg gaacaagagt
2761 ccactattaa agaacgtgga ctccaacgtc aaagggcgaa aaaccgtcta tcagggcgat
2821 ggcccactac gtgaaccatc accctaatca agttttttgg ggtcgaggtg ccgtaaagca
2881 ctaaatcgga accctaaagg gagcccccga tttagagctt gacggggaaa gccggcgaac
2941 gtggcgagaa aggaagggaa gaaagcgaaa ggagcgggcg ctagggcgct ggcaagtgta
3001 gcggtcacgc tgcgcgtaac caccacaccc gccgcgctta atgcgccgct acagggcgcg
3061 tcaggtggca cttttcgggg aaatgtgcgc ggaaccccta tttgtttatt tttctaaata
3121 cattcaaata tgtatccgct catgagacaa taaccctgat aaatgcttca ataatattga
3181 aaaaggaaga gtatgagtat tcaacatttc cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca
3241 ttttgccttc ctgtttttgc tcacccagaa acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat
3301 cagttgggtg cacgagtggg ttacatcgaa ctggatctca acagcggtaa gatccttgag
3361 agttttcgcc ccgaagaacg ttttccaatg atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc
3421 gcggtattat cccgtattga cgccgggcaa gagcaactcg gtcgccgcat acactattct
3481 cagaatgact tggttgagta ctcaccagtc acagaaaagc atcttacgga tggcatgaca
3541 gtaagagaat tatgcagtgc tgccataacc atgagtgata acactgcggc caacttactt
3601 ctgacaacga tcggaggacc gaaggagcta accgcttttt tgcacaacat gggggatcat
3661 gtaactcgcc ttgatcgttg ggaaccggag ctgaatgaag ccataccaaa cgacgagcgt
3721 gacaccacga tgcctgtagc aatggcaaca acgttgcgca aactattaac tggcgaacta
3781 cttactctag cttcccggca acaattaata gactggatgg aggcggataa agttgcagga
3841 ccacttctgc gctcggccct tccggctggc tggtttattg ctgataaatc tggagccggt
3901 gagcgtgggt ctcgcggtat cattgcagca ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc
3961 gtagttatct acacgacggg gagtcaggca actatggatg aacgaaatag acagatcgct
4021 gagataggtg cctcactgat taagcattgg taactgtcag accaagttta ctcatatata
4081 ctttagattg atttaaaact tcatttttaa tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt
4141 gataatctca tgaccaaaat cccttaacgt gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc
4201 gtagaaaaga tcaaaggatc ttcttgagat cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg
4261 caaacaaaaa aaccaccgct accagcggtg gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact
4321 ctttttccga aggtaactgg cttcagcaga gcgcagatac caaatactgt ccttctagtg
4381 tagccgtagt taggccacca cttcaagaac tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg
4441 ctaatcctgt taccagtggc tgctgccagt ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac
4501 tcaagacgat agttaccgga taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca
4561 cagcccagct tggagcgaac gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagctatga
4621 gaaagcgcca cgcttcccga agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc
4681 ggaacaggag agcgcacgag ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct
4741 gtcgggtttc gccacctctg acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg
4801 agcctatgga aaaacgccag caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct
4861 tttgctcaca tgttctttcc tgcgttatcc cctgattctg tggataaccg tattaccgcc
4921 tttgagtgag ctgataccgc tcgccgcagc cgaacgaccg agcgcagcga gtcagtgagc
4981 gaggaagcgg a
//
质粒菌株产品操作说明书质粒菌株产品操作说明书质粒菌株产品操作说明书质粒菌株产品操作说明书质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程一、扩增流程一、扩增流程一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。 收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。 收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序) 1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序) 1 1 1
、质粒干粉(常温运输,存于、质粒干粉(常温运输,存于
-20-20-20
度,度,
909090
天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒; ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒; ①①①
收到质粒干粉后请先收到质粒干粉后请先
5000rpm5000rpm5000rpm
离心离心
1min1min1min
,再加入,再加入
20μl ddH2O20μl ddH2O20μl ddH2O
去离子水溶解质粒;去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作) ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作) ②②②
取取
111
支支
100μl 100μl 100μl
感受态于冰上解冻感受态于冰上解冻
10min10min10min
,加入,加入
2μl2μl2μl
质粒,再冰浴质粒,再冰浴
30min30min30min
后,后,
424242
℃℃℃
热激热激
60s60s60s
,不要搅动,再冰浴,不要搅动,再冰浴
2min2min2min
;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作);(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min; ③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min; ③③③
加入加入
900μl900μl900μl
无抗的无抗的
LBLBLB
液体培养基,液体培养基,
180rpm180rpm180rpm
震荡震荡
373737
℃℃℃
培养培养
45min45min45min
;;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子) ④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子) ④④④
6000rpm6000rpm6000rpm
离心离心
5min5min5min
,仅留,仅留
100μl100μl100μl
上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的
LBLBLB
平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h; ⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h; ⑤⑤⑤
将平板正向培养将平板正向培养
1h1h1h
,再倒置,再倒置
373737
℃℃℃
培养培养
14h14h14h
。如果要求是。如果要求是
303030
度则培养度则培养
20h20h20h
;;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入
10μl10μl10μl
质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。 ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。 ⑥⑥⑥
挑取单菌落至挑取单菌落至
LBLBLB
液体培养基中,加入对应抗生素,液体培养基中,加入对应抗生素,
220rpm220rpm220rpm
震荡培养震荡培养
14h14h14h
,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养) 2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养) 2 2 2
、甘油菌种(冰袋运输,存于、甘油菌种(冰袋运输,存于
-80-80-80
℃℃℃
,保质期,保质期
909090
天,请务必划线挑单克隆培养)天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。 四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。 四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天) 3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天) 3 3 3
、穿刺菌种(冰袋运输,存于、穿刺菌种(冰袋运输,存于
444
℃℃℃
,保质期,保质期
777
天)天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。 穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。 穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天) 4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天) 4 4 4
、菌落平板(冰袋运输,存于、菌落平板(冰袋运输,存于
444
℃℃℃
,保质期,保质期
777
天)天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。 直接挑取单菌落至液体培养基中。 直接挑取单菌落至液体培养基中。直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天) 5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天) 5 5 5
、液体质粒(冰袋运输,存于、液体质粒(冰袋运输,存于
-20-20-20
℃℃℃
,保质期,保质期
909090
天)天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。 单独提取的液体质粒收到后可直接使用。 单独提取的液体质粒收到后可直接使用。单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序) 6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序) 6 6 6
、滤纸质粒(常温运输,存于、滤纸质粒(常温运输,存于
-20-20-20
度,度,
909090
天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。 收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。 收到货后将滤纸画圈部分剪下放入收到货后将滤纸画圈部分剪下放入
EPEPEP
管中,加管中,加
100ul100ul100ul
无菌水将滤纸浸湿并浸泡无菌水将滤纸浸湿并浸泡
5min5min5min
,吸取,吸取
5ul5ul5ul
质粒转化,离心全涂。质粒转化,离心全涂。
二、转化图片二、转化图片二、转化图片二、转化图片
P1949/pENTR223-DPYD人源基因质粒 |
P1950/pENTR223-ABHD4人源基因质粒 |
P1951/pENTR223-SDHC-T491A-G499A人源基因质粒 |
P1952/pENTR223-TRNAU1AP(331-864)人源基因质粒 |
P1953/pENTR223-HMGN3-G221C人源基因质粒 |
P1954/pENTR223-OCIAD2人源基因质粒 |
P1955/pENTR223-MPC1人源基因质粒 |
P1956/pENTR223-S100A16人源基因质粒 |
P1957/pENTR223-LOC79015人源基因质粒 |
P1959/pENTR223-MRPS33人源基因质粒 |
P1960/pENTR223-GPR65人源基因质粒 |
P1961/pENTR223-SSR3人源基因质粒 |
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P1949/pENTR223-DPYD人源基因质粒 |
P1950/pENTR223-ABHD4人源基因质粒 |
P1951/pENTR223-SDHC-T491A-G499A人源基因质粒 |
P1952/pENTR223-TRNAU1AP(331-864)人源基因质粒 |
P1953/pENTR223-HMGN3-G221C人源基因质粒 |
P1954/pENTR223-OCIAD2人源基因质粒 |
P1955/pENTR223-MPC1人源基因质粒 |
P1956/pENTR223-S100A16人源基因质粒 |
P1957/pENTR223-LOC79015人源基因质粒 |
P1959/pENTR223-MRPS33人源基因质粒 |
P1960/pENTR223-GPR65人源基因质粒 |
P1961/pENTR223-SSR3人源基因质粒 |
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P1949/pENTR223-DPYD人源基因质粒 |
P1949/pENTR223-DPYD人源基因质粒 | P1949/pENTR223-DPYD人源基因质粒
P1950/pENTR223-ABHD4人源基因质粒 |
P1950/pENTR223-ABHD4人源基因质粒 | P1950/pENTR223-ABHD4人源基因质粒
P1951/pENTR223-SDHC-T491A-G499A人源基因质粒 |
P1951/pENTR223-SDHC-T491A-G499A人源基因质粒 | P1951/pENTR223-SDHC-T491A-G499A人源基因质粒
P1952/pENTR223-TRNAU1AP(331-864)人源基因质粒 |
P1952/pENTR223-TRNAU1AP(331-864)人源基因质粒 | P1952/pENTR223-TRNAU1AP(331-864)人源基因质粒
P1953/pENTR223-HMGN3-G221C人源基因质粒 |
P1953/pENTR223-HMGN3-G221C人源基因质粒 | P1953/pENTR223-HMGN3-G221C人源基因质粒
P1954/pENTR223-OCIAD2人源基因质粒 |
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P1955/pENTR223-MPC1人源基因质粒 |
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P1956/pENTR223-S100A16人源基因质粒 |
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P1957/pENTR223-LOC79015人源基因质粒 |
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P1959/pENTR223-MRPS33人源基因质粒 |
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P1960/pENTR223-GPR65人源基因质粒 |
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P1961/pENTR223-SSR3人源基因质粒 |
P1961/pENTR223-SSR3人源基因质粒 | P1961/pENTR223-SSR3人源基因质粒
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