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酵母双杂交文库构建

¥16058
Clontech
进口
2021-08-19 21:05

上海善然生物科技有限公司

我要认领
上海善然生物科技有限公司
汪海洋
15900853496
shanranbio@163.com
912888497
产品属性
保存条件 低温
英文名 Make Your Own "Mate & Plate™" Library System
数量 大量
供应商 上海善然生物科技有限公司
规格 5 Rxns
产品说明
Code No. 产品名称
630490   Make Your Own "Mate & Plate" Library System
 
■ 制品说明
Mate & Plate的优点
如果不使用Clontech的预制Mate & Plate Libraries,构建和筛选一个传统的酵母双杂交文库是非常繁冗的。而使用预制文库,只需将MATα型文库菌株和转入诱饵基因构建体的MATa型酵母菌株共同过夜孵育,然后将接合后的菌液涂板于合适的选择培养基上即可,操作简便。Clontech提供多种组织特异的、均一化的通用文库,适用于绝大多数文库筛选。
需要自己的文库吗?您可以自己制作,简便而且快速。
如果Mate & Plate Libraries中没有适合您需要的文库,您可使用Make Your Own Mate & Plate Library System自己制作文库。利用该系统,一周之内即可构建足够用于数百次酵母双杂交筛选实验的所需文库。文库构建是在Y187文库酵母菌株中通过酵母高效的同源重组机制直接完成的 (图1),无需传统文库构建过程中的一些繁冗的操作 (比如文库克隆、扩增和大肠杆菌收集等)。
经济有效的操作以及SMART技术
该系统利用Clontech的SMART cDNA合成技术,使用任意组织来源的少至100ng的总RNA,即可构建cDNA文库。SMART技术利用了MMLV (Moloney murine leukemia virus) RT的末端转移酶活性和模板转换机制,合成的一链cDNA序列末端含有已知的通用引物结合位点。因此,SMART一链cDNA可以通过PCR进行扩增,然后与具有末端同源序列的Matchmaker Gold 猎物载体pGADT7-Rec进行重组。基于以上特征,使用纳克级的RNA (例如来源于显微解剖组织、激光捕获细胞或者活检样品) 即可合成cDNA,共转化这些cDNA和pGADT7-Rec到酵母菌株Y187中,即可直接构建文库。
 
■ 制品特点
1. 利用SMART技术在酵母中直接构建文库
2. 无需繁琐的克隆或文库扩增
3. 足够用于数百次的双杂交筛选
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