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慢病毒载体克隆

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2021-07-13 05:42

美国GeneCopoeia

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美国GeneCopoeia
黄小姐
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sales@igenebio.com
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产品属性
服务名称 慢病毒载体克隆
提供商 GeneCopoeia
产品说明

GeneCopoeia提供慢病毒载体的ORF启动子shRNAmiRNA前体克隆miRNA抑制剂克隆CRISPR/Cas9核酸酶克隆。我们有丰富的融合标签供选择,例如IRES-eGFP、 Avitag®和HaloTag®等。生产过程有严格的质量控制,所有克隆经过全长测序,可用于即时表达。还提供优化的慢病毒包装质粒、细胞系、慢病毒浓缩试剂盒、 慢病毒颗粒以及慢病毒包装服务



产品优势

  • 高效整合基因至多种靶细胞慢病毒系统可高效地把基因转染到活体模式动物和几乎所有的哺乳动物细胞中,包括未分化、处于不活跃或停止生长的细胞,包括神经元细胞、原代细胞、干细胞。慢病毒转导效率接近100%。是理想的表达载体系统。
  • 靶基因的高表达水平:慢病毒表达载体类型包括N或C末端带有融合标签、或不带标签。载体带有可进行高效率包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组中的序列元件,从而使得我们的表达克隆在靶细胞中高效表达。
  • 慢病毒自身复制灭活:OmicsLink™人类ORF 慢病毒表达克隆所采用的载体是自身复制灭活的,由于细胞不带有病毒外壳基因,转染后的细胞并不能产生病毒粒子。此外整合进基因组后导致5’ LTR启动子失活,阻止了慢病毒的复制。


慢病毒载体|编码基因克隆
ORF 慢病毒表达克隆所采用的载体是自身复制灭活的,由于细胞不带有病毒外壳基因,转染后的细胞并不能产生病毒粒子。此外整合进基因组后导致5’ LTR启动子失活,阻止了慢病毒的复制。载体带有可进行高效率的包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组中的序列元件,从而使得我们的表达克隆在目的细胞高效表达。



慢病毒载体|CRISPR/Cas9克隆
CRISPR-Cas9体系是由sgRNA和 Cas9核酸酶构成的DNA靶向识别剪切复合体。sgRNA识别一段20bp、3端紧接着5'-N-G-G-3' PAM位点的DNA靶序列,Cas9核酸酶在该靶序列上生成DNA双链断裂。DNA双链断裂会被细胞的非同源末端连接或 同源重组机制修复。NHEJ机制容易在修复的断裂位点引入插入/缺失突变,造成阅读框移码而产生基因敲除的效果。GeneCopoeia提供Cas9核酸酶及sgRNA慢病毒表达克隆


慢病毒载体|shRNA克隆
表达质粒DNA或包含shRNA的病毒颗粒被导入靶细胞。使用哺乳动物启动子驱动目的序列的转录,序列经设计包括茎(19-29对核苷酸)和环,随后由 RNAi机制中的酶加工成为成熟的siRNA,siRNA和RISC复合体对目的基因所转录的mRNA产生特异的切割降解作用,从而导致了基因表达抑制。GeneCopoeia提供45,000条人类、小鼠基因;针对每个靶标基因提供4个shRNA克隆,保证至少一个克隆抑制效率达70%!


慢病毒载体|miRNA抑制剂克隆
慢病毒载体的miRNA抑制剂表达克隆 ,采用H1或者U6启动子驱动miRNA抑制剂的转录,以保证能在大多数哺乳动物细胞中高水平表达。载体表达的miRNA 抑制剂特异、稳定地结合细胞内成熟的靶miRNA,阻止miRNA介导的靶标mRNA的降解或者翻译抑制。miRNA抑制剂克隆可转(感染)染细胞进行瞬 时抑制或者稳定抑制。GeneCopoeia的miRNA种类涵盖最新miRBase数据库,拥有优越且持久的一致效率,极低的细胞毒性!



慢病毒载体|miRNA前体表达克隆
慢病毒载体的miRNA前体表达克隆是采用基于猫免疫缺陷病而构建的。RNA聚合酶III型的H1启动子驱动转录前体miRNA的茎环前体(大约有150核苷酸长度)。 随后通过RNAi的酶系加工生成成熟的miRNA。使得在同一载体的CMV启动子的驱动下共表达报告基因eGFP,双顺反子下游的新霉素筛选基因也同时表 达。可作为监测miRNA表达,转染和转化的效率的参考标准。GeneCopoeia的miRNA种类涵盖最新miRBase数据库,其表达克隆经表达框全长测序,载体经优化后确保成熟miRNA的高表达。


慢病毒载体|启动子克隆
GeneCopoeia 提供已构建好的GLuc-ON启动子克隆,包括提供单报告基因载体系统和双报告基因载体系统。
单报告基因载体系统以Gluc或GFP作为启动子报告基因;双报告基因载体系统以Gluc作为启动子报告基因,以分泌型碱性磷酸酶(SEAP)作为信号标准化的内参。 GLuc-ON™ 启动子克隆采用分泌型的Gaussia荧光素酶(GLuc)作为报告子,可在活细胞中对超过20,000种人类和18,000种小鼠启动子进行实时活性分析。




具体详情,请联系 销售工程师 或 拨打热线电话: 4006-020-200

更多产品信息请点击:

http://www.igenebio.com/product/lentivirus-system/#3


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