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绿豆核酸酶

询价
2020-03-24 18:46

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产品属性
货号 #M0250L
数量
规格 7,500 units
产品说明






♦  除去 DNA 或 RNA 分子的 3' 或 5' 突出末端,形成可以用连接酶连接的平齐末端
♦  构建转录图谱
♦  切割发夹结构中的 loop 环
♦  从基因组 DNA 中切除基因编码序列
♦  产生新的限制性酶切位点(如图)


 
 
 
 
 
 
 
 A) 分子量标准(λDNA/HindIII消化)
 B) M13mp8(超螺旋形式)
 C) M13mp8/NcoI消化
 D) M13mp8/HindIII消化
 E) 绿豆核酸酶处理D泳道产物
 F) E泳道产物加入T4 DNA连接酶
 G) NcoI消化F泳道产物
 H) HindIII消化F泳道产物


概述
本品是一种单链DNA或RNA特异性的内切酶,可以从DNA或RNA分子的末端降解单链突出粘端,产生可连接的平末端。


来源
绿豆芽。


反应条件
1X 绿豆核酸酶反应缓冲液 [50 mM NaAc(pH 5.0 @ 25 ℃),30 mM NaCl,1 mM ZnSO4],30 ℃ 温育。在NEBuffers 1、2、4 中也有活性。


质保声明
无双链外切酶污染。


单位定义
1 单位指 30 ℃ 条件下,1 分钟产生 1 μg 酸溶性总核苷酸所需要的酶量。


活性检测条件
1X 绿豆核酸酶反应缓冲液,以0.5 mg/ml 变性的小牛胸腺DNA作底物。




浓度
10,000 units/ml


贮存条件
10 mM NaAc (pH 5.0 @ 25°C), 0.1 mM ZnAc, 1 mM cysteine, 0.001% Triton-X 100 和 50% 甘油。-20°C 贮存。


使用注意
不要尝试热失活。在该酶热失活前,DNA 会发生“呼吸”作用,从而导致降解。


参考文献
(1) Kowalski, D. et al. (1976) Biochemistry, 15, 4457–4463.
(2) McCutchan, T.F. et al. (1984) Science, 225, 626–628.


产生新的限制性酶切位点(见图)
M13mp8 polylinker克隆区所含序列:
5´...CCAAGCTTGG...3´
3´...GGTTCGAACC...5´
用HindIII进行消化
5´...CCA AGCTTGG...3´
3´...GGTTCGA ACC...5´
加入绿豆核酸酶(除去5´突出端)
5´...CCA TGG...3´
3´...GGT ACC...5´
加T4 DNA连接酶
5´...CCATGG...3´
3´...GGTACC...5´
产生新的NcoI(NEB #R0193)酶切位点


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