杆状病毒是什么病毒?杆状病毒表达系统的优势介绍
杆状病毒是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒,其基因组大小为80-180kb,在自然界中以节肢动物作为专一性宿主进行感染和传播。杆状病毒区别于其他病毒的一个特点是其具有两种不同的病毒粒子形态:一种为出芽型的病毒粒子(buddedvirus,BV),主要介导细胞与细胞之间的系统感染,入侵细胞是通过受体介导的内吞作用;另一种为包埋型的病毒粒子(Occlusion-derivedvirus,ODV),在病毒的口服感染过程中,节肢动物肠道碱性环境使包埋型的病毒粒子外壳脱落,萌发成具有侵染能力的病毒并感染肠道细胞达到病毒传播。
杆状病毒表达系统
体外基因表达系统包括原核细胞系统和真核细胞系统。原核细胞系统主要是大肠杆菌细胞系统,它操作简便,周期短,收益大,表达产物稳定,但是表达基因的分子量有限,不宜过大,且不能对表达产物进行一些翻译后加工作用。真核细胞系统包括COS细胞、CHO细胞、酵母细胞和昆虫细胞等表达系统。昆虫细胞表达系统(即杆状病毒表达系统)独特的生物学特性,日益受到人们的重视。昆虫细胞培养及操作较简便,成本低,因此被广泛用于生产基因工程产品。本文就该系统的特性、技术方法以及应用新进展作一综述。
昆虫杆状病毒表达系统(BEVS),是现阶段使用最为广泛的表达系统之一,是一种利用杆状病毒来表达外源基因的载体,一般通过感染昆虫细胞或幼虫来表达外源蛋白。因为其所携带的动物病毒片段不会对哺乳动物产生任何致病性,所以,自昆虫杆状病毒表达系统问世以来,就得到了广泛的使用。
那么,昆虫杆状病毒表达系统的优势具体体现在哪些方面呢?
1、安全性能好。
2、携带的外源基因大。
3、外源蛋白表达水平高。
4、具备良好的生物活性。
和哺乳动物表达系统相比,其具备哪些优势呢?
1)培养所需要的条件相对简单,不需要通过CO2
2)培养成本相对更低
3)不容易被细菌污染
4)得到的蛋白含量高
义翘神州自主研发的昆虫细胞专用培养基—SIM SF培养基,可以维持~6x106细胞/mL的培养水平,打造了杆状病毒-昆虫表达平台。此外,义翘神州对表达载体和病毒包装技术进行了优化,结合实验人员在重组蛋白表达纯化方面的经验,可为客户提供优质的重组表达服务。义翘神州拥有多种常用昆虫细胞系(Sf9, Sf21, High-Five),一般来说,Sf9更利于病毒扩增,Hi5更利于蛋白表达。义翘采用的是Sf9扩增病毒,Hi5重组表达,并且凭借优化的表达载体和更高滴度的病毒包装技术,有效提高蛋白表达量,交付高活性蛋白。
更多详情可以关注杆状病毒-昆虫表达平台:https://cn.sinobiological.com/services/platform/baculovirus-insect-protein-expression
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