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AbMole科研-IL-8与PTEN失活相互作用通过STAT3通路促进HNSCC恶性进展

2022年05月05日 12:01   生物.医药.天然产物

奥默生物技术(上海)有限公司 发布 访问商铺

关键字:白细胞介素8

AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:IL-8PTEN失活相互作用通过STAT3通路促进HNSCC恶性进展。

 

白细胞介素 8 (IL-8) 的表达与许多癌症的不良预后相关,包括头颈部鳞状细胞癌 (HNSCC),但其潜在机制却知之甚少。在这项研究中,我们发现 IL-8 的过表达与 HNSCC 患者的不良预后相关。 IL-8 在体外和体内显著增加细胞增殖、迁移和侵袭能力,这可以被 CXCR1/2 抑制剂阻断。 IL-8 促进 HNSCC 细胞中 MMP2MMP9、蜗牛和波形蛋白的表达。此外,IL-8 可以通过磷酸化使 PTEN 失活,然后失活的 PTEN 影响 STAT3 的磷酸化。在细胞质中内化的重组 PTEN 降低了磷酸化 STAT3 的表达,而 PTEN 的敲低导致磷酸化STAT3 的表达增加。STAT3 抑制剂可以逆转由 IL-8 刺激介导的侵袭相关蛋白的上调。此外,snail 和失活 PTEN 的过表达共同促进了 IL-8 对肿瘤细胞的自分泌作用。最后,IL-8HNSCC组织中snailvimentin的表达呈正相关。总之,我们的研究表明,PTEN 作为一种新的分子开关来调节 IL-8/STAT3 信号传导,促进 HNSCC 的进展,并表明该途径可能是 HNSCC 的潜在治疗靶点。


rhIL-8AbmoleM9368,纯度≥95%),重组人白介素18Recombinant Human IL-18)又被称之为γ-干扰素诱导因子,是一种炎性细胞因子,属于白介素1家族,可以由巨噬细胞和其他细胞产生。在本研究中,用于构建动物模型(0.5 mg/kg, s.c., 每两天注射一次)。ReparixinAbmoleM5160,纯度>98%)是一种CXCL8受体抑制剂,同时还能抑制CXCR1CXCR2的活性,能减低多种损伤模型中的炎症反应。在本研究中,用于构建动物模型( 15 mg/kg, i.p., 每天注射一次)。


Fig. 2 IL-8 promotes malignant progression in HNSCC cell lines.

 

为了进一步探索高IL-8表达患者预后不良的机制,将重组人IL-8rhIL-8)添加到HNSCC细胞系中,并在体外进行了一系列实验。伤口愈合试验表明,HN4HN6 Cal27 的迁移能力相对于 rhIL-8 的浓度增加(图 2aP < 0.01)。 transwell 分析表明,在有或没有 Matrigel 的情况下,下室中的细胞数量相对于 rhIL-8 浓度增加(图 2bcP < 0.01)。集落形成测定具有相似的结果:具有 10 ng/ml 100 ng/ml rhIL-8 的组的克隆簇数量增加(图 2dP < 0.01)。rhIL-8 也显著增强了细胞增殖(图 2eP < 0.05)。Western印迹分析显示,rhIL-8治疗组中E-钙粘蛋白的表达减少,MMP2MMP9和波形蛋白的表达增加(图2f)。这些结果表明IL-8增强了HNSCC细胞的转移和增殖能力。



Fig. 3 A CXCR1/2 blocker inhibits IL-8-induced cancer-promoting activity

 

伤口愈合试验、迁移试验和侵袭试验的结果表明,Reparixin 可以显著逆转 rhIL-8 刺激介导的促进作用(图 3a-c)。蛋白质印迹还显示,MMP2MMP9 和波形蛋白的表达增加被 Reparixin 阻断(图 3d)。有趣的是,我们发现单独使用 Reparixin 也可以抑制 HNSCC 细胞的迁移和侵袭能力。这些结果表明,Reparixin 可以阻断肿瘤细胞的外源性 IL-8 和自分泌 IL-8


Fig. 4 IL-8 facilitates HNSCC progression in vivo through CXCR1/2.

 

为了证实体外研究的结果,如所述将rhIL-8Reparixin注射到小鼠中。与体外研究相似,rhIL-8 治疗的肿瘤在所有三组中生长最快,而 IL-8 + Reparixin 组生长最慢(图 4a-c)。这种趋势从第 2 周开始,可以在整个过程中观察到(图 4d)。单独使用 Reparixin 也可以限制肿瘤生长。除了增殖能力外,IL-8 促进的迁移和侵袭能力也通过肺转移模型确定。结果表明,IL-8 显著增加了肺中转移结节的数量,这被 CXCR1/2 阻滞剂抑制(图 4e)。进行 H&E 染色以确定转移结节的病理类型(图 4f)。根据我们之前的结果,异种移植肿瘤的 IHC 染色显示 IL-8 治疗组的 IL-8 和蜗牛表达显著高于对照组(图 4g)。这一结果暗示IL-8可以启动EMT程序以促进HNSCC的恶性进展。

 

鸣谢:Qiaoshi Xu, et al. Cell Death Dis. 2020 May 29;11(5):405.

 

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