HEPES（4-羟乙基哌嗪乙磺酸）是一种氢离子缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2。我们在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。它是一种弱酸，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右，下面我们继续看看HEPES在细胞培养中的应用。

1.HEPES在低温时可较好地保持酶的结构和功能

HEPES缓冲液是一种弱酸，常作为有机化工中的两性离子缓冲剂和医药中间体。该物质的分解能力可随温度的升高而增强，随温度的降低而减弱，但与其他缓冲剂相比，它的分解常数随温度变化不大，这使HEPES缓冲液成为在低温时可较好地保持酶的结构和功能的缓冲剂。

2.HEPES PH值范畴有益于细胞培养

通常，大多数细胞的最佳培养环境是pH7.2-pH7.4，而Hepes的缓冲范围刚好为pH6.8-pH8.2内。这对细胞培养是有益的，与其他缓冲剂相比，Hepes在维持细胞培养基的pH值方面具有更高的稳定性，这也是Hepes广泛用于细胞培养，组织培养，蛋白质纯化和提取，免疫沉淀，细胞裂解，活细胞成像和其他生物/生化研究的原因。