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「AbMole科研」lncRNA H19通过靶向miR-29b-3p和修饰STAT3来促进LUSC细胞的活力和上皮间质转化

2021年04月28日 16:27   生物.医药.天然产物

奥默生物技术(上海)有限公司 发布 访问商铺

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AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:lncRNA H19通过靶向miR-29b-3p和修饰STAT3来促进LUSC细胞的活力和上皮间质转化。


考虑到长非编码RNAlncRNA)和microRNAmiRNA/miRs)对肿瘤发生的共同贡献,本研究的目的是研究lncRNA H19是否靶向miR-29b-3p以及如何靶向miR-29b-3p影响LUSC的进展通过调节信号转导子和转录激活子3STAT3)来实现。


本研究中总共使用了305LUSC组织和4种人LUSC细胞系(即Calu-3NCI-H1975A549NCI-H23)。将pcDNA3.1-H19,短干扰RNAsi-H19miR-29b-3p模拟物,miR-29b-3p抑制剂和阴性对照(NC)转染到细胞中,并使其增殖,存活和凋亡分别使用Cell Counting Kit-8测定,集落形成测定和流式细胞术确定。结果表明,高表达的H19和低表达的miR-29b-3p可以作为预测LUSC患者预后不良的指标。此外,si-H19miR-29b-3p模拟物显着增加了LUSC细胞的凋亡,并降低了细胞的存活率和生存能力。同时,上皮-间质转化(EMT)特异性蛋白的表达也发生了显着变化,即上皮钙粘蛋白表达增加,波形蛋白,SnailSlug表达减少。此外,miR-29b-3p已被H19靶向和调节,而STAT3miR‑29b‑3p靶向和修饰。最终,确定STAT3可以降低miR-29b-3p施加的LUSC细胞的生存力,存活率,细胞凋亡和EMT。总之,本研究的结果表明,lncRNA H19/miR-29b-3p /STAT3信号传导参与了LUSC的发展,这对于制定有效的LUSC诊断和治疗策略可能至关重要。


Cell Counting Kit‑8AbMoleM4839)用于进行细胞增殖测定。


CCK-8溶液添加到每个孔中,浓度为10µl /孔。在37°C下放置1时进行孵化,在吸光度为450 nm处计算细胞增殖率。根据CCK-8,流式细胞仪和集落形成分析的结果,与si-H19组相比,si-H19组的Calu-3和NCI-H1975细胞系的增殖,生存力和存活率显著低于NC组


鸣谢:Lihua Liu, et al. Int J Oncol. 2019Mar;54(3):929-941.

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