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【AbMole科研快报】toll样受体4在晚期糖基化终产物诱导的M1巨噬细胞极化中起关键作用

2021年01月12日 17:45   生物.医药.天然产物

奥默生物技术(上海)有限公司 发布 访问商铺

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AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:toll样受体4在晚期糖基化终产物诱导的M1巨噬细胞极化中起关键作用
本研究旨在研究toll样受体4 (TLR4)在晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导巨噬细胞向M1方向极化中的作用。在研究中,研究人员将分离的初代巨噬细胞以0、2.5、5和10 mmol/L的浓度暴露于制备的培养基中。巨噬细胞还暴露于过氧化氢(H2O2)中,以提供外源性活性氧(ROS)。AGEs受体(RAGE)通过载体过度表达。特异性siRNA沉默TLR4和抑制剂TAK -242用以预处理巨噬细胞。在检测环节,分别利用DCFH-DA测定细胞内ROS、免疫荧光染色评价M1巨噬细胞表型标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达、PCR检测TLR4和RAGE的mRNA表达水平、免疫印迹法检测细胞质RAGE、TLR4、核信号转导器和转录激活因子1 (STAT1)蛋白表达水平及STAT1磷酸化水平、ELISA法测定巨噬细胞细胞培养液上清中IL6、IL12和肿瘤坏死因子TNF-ɑ的浓度。

结果显示,AGEs显著提高细胞内ROS生成、iNOS表达水平、胞质RAGE、TLR4、核STAT1、胞质STAT1磷酸化水平以及IL6、IL12和TNF-ɑ含量,且呈浓度依赖性。在AGEs暴露的巨噬细胞中,TLR4沉默和抑制剂预处理降低了细胞质RAGE、TLR4、STAT1和核STAT1的表达水平,而不影响RAGE表达和细胞内ROS生成水平。RAGE过表达使巨噬细胞中ROS和TLR4表达水平升高。在H2O2处理的巨噬细胞中也发现TLR4表达升高。总结来说,AGEs通过激活RAGE/ROS/TLR4/STAT1信号通路诱导巨噬细胞向M1极化。


TAK-242 (Abmole, M4838,纯度 >98%) 是TLR4信号通路抑制剂,能通过结合TLR4胞内区域抑制脂多糖诱导的炎症介质的产生。


研究人员拍摄了iNOS、DAPI的免疫荧光染色图像,并标示出分别经TLR4 - siRNA或TLR4特异性抑制剂TAK-242预处理的AGEs暴露巨噬细胞后的平均荧光强度,以研究TLR4对巨噬细胞M1极化的影响。其中TAK-242购自于Abmole。
鸣谢:A Z L , A Y M , A Q C , et al. Toll-like receptor 4 plays a key rolein advanced glycation end products-induced M1 macrophage polarization -ScienceDirect[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020,531( 4):602-608.

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