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阿魏酸的制备方法
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可通过三种途径从植物中获得阿魏酸:一是从阿魏酸与一些小分子的结合物中获得,二是从植物细胞壁中获得,三是通过组织培养获得。植物中阿魏酸多通过酯键与多糖和木质素交联或自身酯化或醚化形成二阿魏酸,一般用碱法和酶法打断酯键释放阿魏酸,再采用合适的溶剂进行提取。
1、碱解法
采用4%****在通氮气条件下常温反应24h,可释放出细胞壁中出的阿魏酸。最近研究发现通过提高提取温度,并加入适合的保护剂,在较短时间内就能将麦麸中大部分阿魏酸游离出来。欧仕益等采用低浓度的****溶液,在适当的提取温度下能将麦麸中的大部分阿魏酸释放出来,提取过程中添加亚硫酸钠可增加阿魏酸的回收率。由于碱液成分复杂,特别是含有色素物质,目前,碱液中阿魏酸的分离方法主要是采用活性炭吸附法。谷维素中含有阿魏酸的结构单元,以酯的形式存在,且易于分解,因此,可以先用碱水解谷维素,再用酸化的方法制备阿魏酸,其反应式水解谷维素制备阿魏酸的操作方便,收率高达85.7%,副产品为环木菠萝醇类。而且谷维素来源广、产量大,并且价格适中。
2、 阿魏酸酯酶法
阿魏酸酯酶是指能将阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯和多糖阿魏酸之中阿魏酸游离出来的一种酶。真菌、细菌和酵母都能分泌阿魏酸酯酶。张璟等以黑曲霉作菌种,采用液体深层发酵法,制备出含有阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶的混合酶制剂,采用混合酶制剂作用于去淀粉的麦麸,发现通过3次降解后麦麸降解率达55.46%。
3、植物组织培养法
采用植物组织培养法是获得阿魏酸的一条重要途径。一些研究表明,对某些植物组织培养能使之产生较高产量的阿魏酸衍生物。如对糖甜菜、玉米进行细胞悬浮培养能获得水溶性的阿魏酸葡萄糖酯、阿魏酸蔗糖酯等,含量可高达20.0unol/g愈伤组织(干重)。直接提取物中,阿魏酸的含量比较低,需要进一步的纯化。 阿魏酸的化学合成法是以香兰素为基本原料,主要应用的有机反应有Wittig-Horner反应和Kneoevenagel反应。
1、Wittig-Horner反应合成阿魏酸
亚磷酸三乙酯乙酸盐和乙酰香兰素在强碱体系中发生Wittig-Horner反应,再用浓盐酸酸化得到阿魏酸。该法需要预先保护酚羟基,否则由于强碱的存在,生成酚钠例子会抑制羰基和碳负离子之间的反应,还易发生副反应生成杂质。
2、Kneoevenagel反应合成阿魏酸
在吡啶溶剂中加入少量有机碱作为催化剂,香兰素和丙二酸发生Kneoevenagel反应生成阿魏酸,催化剂有哌啶和苯胺等。但该法反应时间长,长达三周,且获得是反式和顺式阿魏酸混合物。
3、生物合成法
生物合成法是用几种微生物(Arthrobacter Blobiformis)将阿魏酸前体转化为阿魏酸,如将丁香油中提取得到的丁子香酚肉桂酸酯转化为阿魏酸。生物合成法是一种清洁有效的合成方法,但目前仍未能研究出大量生产的方法。 目前提纯阿魏酸的方法不是很多。主要有溶剂萃取法和吸附法。
1、溶剂萃取法
常用的萃取阿魏酸的溶剂主要有乙醇、乙酸乙酯等。原理是利用对阿魏酸的溶解度大的溶剂萃取提取液中的阿魏酸,然后减压蒸馏除去溶剂,从而获得阿魏酸成品。此法工艺较简单但收率较低,能耗较大,是提纯阿魏酸最常用的方法。
2、吸附法
吸附法是目前研究比较多的一种提纯方法。原理是通过加入吸附材料对溶液中的阿魏酸进行吸附富集,然后采用洗脱剂洗脱吸附的阿魏酸。Couteau从活性炭、聚苯乙烯交联树脂、PVPP等吸附介质中进行了筛选,研究表明活性炭以其对阿魏酸高度的吸附能力(每100g吸附22g)、不结合单糖分子、容易洗脱等优点为最好的吸附介质。在活性炭吸附结束后,可以用乙醇把吸附的阿魏酸洗脱下来。另外活性炭也是一种优良的吸附材料,提取液经活性炭吸附后,当活性炭达到吸附饱和之后,经洗脱可以从提取液中获得较纯的阿魏酸。
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