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荧光素酶报告基因检测原理以及选择?
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报告基因应该是已经被克隆出来、在受体细胞中并不存在与这种基因相同或相似的内源性表达产物、并且其表达产物是能够进行测定可以定量的基因。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。 Promega用的比较多,但价格比较贵,国内做的不错的有上海炎熙生物的试剂盒,价格比较便宜,性价比高。他们的试剂盒是经过优化处理的,信号保持时间长。很适合高通量筛选。
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