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马白细胞介素1(IL-1)使用步骤说明

2018年06月04日 15:33   化工资讯

上海广锐生物科技有限公司 发布 访问商铺

关键字:马白细胞介素1(IL-1)使用步骤说明

马白细胞介素1(IL-1)使用步骤说明

  1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L,20ng/L)。
  2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
  5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  7. 温育:操作同3。
  8. 洗涤:操作同5。
  9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

马白细胞介素1(IL-1)使用步骤说明

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定马血清,血浆,细胞上清液及相关液体样本中白细胞介素1(IL-1)的含量。

实验原理:

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中马白细胞介素-1(IL-1)水平。用纯化的马白细胞介素-1(IL-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-1(IL-1),再与HRP标记的白细胞介素-1(IL-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-1(IL-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中马白细胞介素-1(IL-1)含量。

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定马血清,血浆,细胞上清液及相关液体样本中白细胞介素1(IL-1)的含量。

实验原理:

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中马白细胞介素-1(IL-1)水平。用纯化的马白细胞介素-1(IL-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-1(IL-1),再与HRP标记的白细胞介素-1(IL-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-1(IL-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中马白细胞介素-1(IL-1)含量。


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